transwell 回收

今天给大家分享transwell小室回收利用，其中也会对transwell 回收的内容是什么进行解释。

简述信息一览：

• 1、transwell重复利用方法
• 2、Transwell小室应用
• 3、实验方法|transwell培养小室法检测细胞的迁移
• 4、transwell实验检测细胞迁移的具体操作和要点有哪些?
• 5、Transwell小室名词解释
• 6、Transwell小室的使用方法

transwell重复利用方法

我们都是反复用的...胰酶泡然后酒精泡，紫外灭菌 或者用完后拿棉签擦，清洗后，泡酒精过夜，紫外照射3h。。再或者如果可以换膜（有的不行），可以考虑买膜，然后自己装好后涂胶。一般transwell小室都是一次性的，能体会你的心情，我也很久没这么做了。

可以用这个办法处理：先用PBS洗两次，擦去膜上层细胞，甲醇固定20min，0.1%结晶紫染色15-20min，用PBS洗掉多余的染色就好了。结晶紫是先配成0.5%的储液，用的时候再用PBS稀释，称0.5g结晶紫，溶到100mlPBS中。

培养细胞：将接种后的Transwell小室放入培养箱中，按照预定的时间进行培养。 结果统计：***用直接计数法或间接计数法统计实验结果。 实验注意事项： 选用合适的Transwell小室、上层培养液、细胞、基质胶和下层培养液对实验结果有着重要影响。

重复利用小室时，注意轻柔擦拭避免损伤膜结构。使用前在显微镜下检查小室膜是否有裂缝。 孔径选择 选择的孔径应远小于细胞直径，以确保实验的准确性。例如，8μm孔径是常见选择。

Matrigel使用：避免反复冻融，正确分装和保存。增殖影响：控制实验时间，尽量减少增殖对数据的影响。小室重复使用：轻柔擦拭避免损伤膜结构，使用前检查膜是否有裂缝。孔径选择：选择远小于细胞直径的孔径，如8μm，确保实验准确性。

Transwell小室应用

Transwell小室主要应用于细胞间相互作用研究、细胞趋化性研究、肿瘤细胞迁移研究以及肿瘤细胞侵袭实验。细胞间相互作用研究：当研究侧重于细胞的功能而非运动能力时，可选择孔径小于0um的聚碳酸酯膜。

针对细胞的趋化性研究，***用0um、0um或10um的膜进行Transwell实验，上室细胞能穿过膜进入下室，通过计数进入下室的细胞数量，评估下室成分对上室细胞的趋化效应。具体应用如下：- 研究细胞B对细胞A的趋化作用：将细胞A置于上室，细胞B置于下室，评估B细胞分泌物对A细胞迁移的影响。

常用0.0m。常用的是0.4m。将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。（2）趋化性实验：可用0、0、10m膜，上室细胞可穿过聚碳酸酯膜进入下室，计数进入下室的细胞量可反映下室成分对上室细胞的趋化能力。

Transwell小室具有灵活性，可以***用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，以适应共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等不同研究需求。在使用时，需考虑到细胞大小，以选择适合的Transwell小室，确保研究结果的准确性。

实验原理： Transwell小室可看作是膜滤器或有通透性的支架，通过在孔板中放置，实现细胞培养在上层，而营养液或培养基在下层，下层的成分能影响上层细胞。 Transwell小室的底层有一层具有微孔的通透性膜，孔径大小在0.110μm之间，常用材料为聚碳酸酯膜。

在进行实验时，首先将Transwell小室放置于培养板中，此时小室内部被称为上室，而培养板内部则被称为下室。在上室内加入待培养的细胞，下室内则加入培养液。这两层之间是通过聚碳酸酯膜隔开的，这种膜具有一定的通透性，使得下层培养液中的成分能够影响上室内的细胞。

实验方法|transwell培养小室法检测细胞的迁移

1、将transwell培养小室放入24孔板中，确保小室与孔板底部紧密贴合，无气泡产生。分组处理：共分2组，每组3个复孔。一组在小室下层分别加600μl无血清培养基作为对照组；另一组加600μl含10%胎牛血清的培养液作为实验组，以模拟细胞迁移的***因素。在小室内加入100μl含3×10^4个细胞的单细胞悬液。

2、实验步骤 基质胶铺板：将Matrigel胶均匀铺于Transwell小室底部，模拟体内基底膜。 制备细胞悬液：将细胞调整到适当密度，制备成细胞悬液。 接种细胞：将细胞悬液接种于上室，注意避免气泡并确保细胞均匀分布。

3、使用前，向每个 Transwell 小室中加入 50 μl 无血清培养液。在 37℃ 室温下孵育 30 min，进行基底膜水化，以提高细胞贴壁和迁移效率。制备细胞悬液 将细胞进行血清饥饿处理，撤去血清饥饿 12～24 h，以去除血清对细胞迁移的影响。使用胰酶消化细胞，终止消化后离心，弃去培养液。

4、transwell实验是一种常用的细胞生物学研究方法，主要用以检测细胞迁移、趋化以及肿瘤细胞侵袭等现象。实验的关键是利用transwell培养小室，该小室底部具有通透性聚碳酸酯膜，孔径大小可选，通常范围在0.1~12μm。实验步骤如下： 在24孔板中每孔接种8×10E4个细胞，24小时后进行培养。

5、Transwell实验检测细胞迁移的具体操作和要点如下：具体操作： 细胞接种：在24孔板中每孔接种8×10^4个细胞，并进行24小时的培养。 细胞准备：弃除培养基后，用PBS洗涤细胞，再用消化液消化细胞。之后用无血清培养液重悬细胞，调整细胞密度至30万/ml。

transwell实验检测细胞迁移的具体操作和要点有哪些?

1、Transwell实验检测细胞迁移的具体操作和要点如下：具体操作： 细胞接种：在24孔板中每孔接种8×10^4个细胞，并进行24小时的培养。 细胞准备：弃除培养基后，用PBS洗涤细胞，再用消化液消化细胞。之后用无血清培养液重悬细胞，调整细胞密度至30万/ml。 设置实验组：将transwell小室置于24孔板中，每孔分为两组。

2、在24孔板中每孔接种8×10E4个细胞，24小时后进行培养。 弃除培养基，用PBS洗涤细胞，再用消化液消化，之后用无血清培养液重悬细胞，调整密度至30万/ml。

3、在操作过程中，要确保transwell小室与孔板底部紧密贴合，避免产生气泡，以免影响细胞的迁移和计数结果。染色完毕后，要仔细擦净孔膜上层的细胞，并保持膜面的平整，以免影响后续拍照和计数结果的准确性。在进行细胞计数时，要确保每个视野的计数准确性和代表性，以避免误差的产生。

4、迁移实验要点： 实验原理：利用Transwell小室，其上室含有细胞，下室含有培养液，两者由聚碳酸酯膜分隔。细胞在趋化因子的作用下，会穿过膜从上室迁移到下室。

Transwell小室名词解释

Transwell小室是一种具有通透性的杯状装置，它的名称来源于“Trans”这个词根，意味着转移、转运或穿过，“well”则表示小室。根据Corning公司的Transwell说明书，它通常被视作一种膜滤器或有通透性的支架。Transwell小室的核心设计在于其独特的多孔膜，这层膜被放置在小室的隔板上。

Trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。

系膜的名词解释： 系膜又称肾小球系膜，血管球毛细血管的支持成分。血管球依赖系膜悬挂在肾小囊内，在血管极部分为球外系膜区，毛细血管之间为球内系膜区。其面积随年龄增加，新生儿占肾小体切面 积2%，老年时增加到4%。

Transwell小室的使用方法

1、在进行实验时，首先将Transwell小室放置于培养板中，此时小室内部被称为上室，而培养板内部则被称为下室。在上室内加入待培养的细胞，下室内则加入培养液。这两层之间是通过聚碳酸酯膜隔开的，这种膜具有一定的通透性，使得下层培养液中的成分能够影响上室内的细胞。

2、Transwell小室具有灵活性，可以***用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，以适应共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等不同研究需求。在使用时，需考虑到细胞大小，以选择适合的Transwell小室，确保研究结果的准确性。

3、将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

4、调整细胞密度至30万/ml，以备后续接种。接种transwell小室 将transwell培养小室放入24孔板中，确保小室与孔板底部紧密贴合，无气泡产生。分组处理：共分2组，每组3个复孔。一组在小室下层分别加600μl无血清培养基作为对照组；另一组加600μl含10%胎牛血清的培养液作为实验组，以模拟细胞迁移的***因素。

关于transwell小室回收利用，以及transwell 回收的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。