一抗回收液多少度保存

本篇文章给大家分享一抗回收利用，以及一抗回收液多少度保存对应的知识点，希望对各位有所帮助。

简述信息一览：

• 1、为什么一抗可以回收二抗不能
• 2、一抗回收后可用几次
• 3、回收的一抗怎么保存
• 4、一抗回收液多少度保存

为什么一抗可以回收二抗不能

二抗可以回收。一抗回收原因；免疫组化操作中多余一抗的回收利用，能迅速通过高热效应和高分子运动破坏甲醛固定之后产生的交联，暴露抗原决定簇。二抗可以回收利用，但最好不要太多次，否则信号就没了，而且二抗也很便宜的，完全没有必要回收。一抗二抗是指非抗体性抗原和能和抗体结合，即抗体的抗体。全称第一抗体、第二抗体。

因为一抗我们是用BSA加叠氮钠稀释的，要回收，一般只要不长细菌就一直用，但是中间要补一些抗体，不然太稀了曝不出来，二抗是用脱脂奶粉稀释的，不回收。

不回收的。一抗是用BSA加叠氮钠稀释的，要回收，只要不长细菌就一直用。二抗是用脱脂奶粉稀释的，不回收，所以不行了。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。

二抗都是重复利用的。一般都是使用3次左右（时间不超过5天）；做GAPDH时，二抗甚至经常使用5-7次，效果无影响。一抗就是针对你的蛋白的抗体，一般比较特异，若你的蛋白不是常见的，则需要定制（譬如用你的蛋白注射兔子）。二抗是针对一抗的抗体，看你的一抗来自哪种动物，它具有普遍性。

然而，对于二抗来说，情况有所不同。由于二抗的价格相对较低，直接丢弃是更经济的选择。重复使用二抗不仅增加了实验复杂性，还可能引入额外的变数，影响实验结果的准确性。在进行Western Blot实验时，抗体的选择和使用是关键因素。一抗的重复使用需要考虑抗体本身的稳定性和实验的一致性。

二抗的引入使得实验流程更加灵活。首先，二抗可以针对多种不同的一抗，包括那些未标记酶的一抗。这意味着科学家可以使用通用的二抗，而无需为每种一抗都准备带有酶标的版本。其次，二抗的存在提高了检测的敏感度，因为酶标二抗可以放大信号，使得微弱的信号也能被检测到。

一抗回收后可用几次

保存得当的话，一抗工作液可重复利用2-3次一般不影响效果，但也不绝对，主要是看你的抗体本身如何，如果第一次做出来效果就不理想就不提倡这么做了。一抗二抗是指非抗体性抗原和能和抗体结合，即抗体的抗体。全称第一抗体、第二抗体。

WB一抗可回收（4℃短期或-20℃长期保存，加防腐剂），但重复次数不宜过多。IHC一抗通常一次性使用，避免组织成分污染。特殊抗体处理 磷酸化抗体：稀释液需含BSA，禁用脱脂奶粉。荧光标记二抗：稀释液避光保存，避免淬灭。避免交叉污染 不同抗体需独立分装稀释，避免反复冻融降低效价。

洗膜：一抗孵育完成后，将一抗回收并用TBST洗涤3次，每次5min。孵育二抗：提前配制好二抗（一般稀释比例为1：4000），将膜平铺于二抗中，室温孵育1h（注意二抗的属性来源是否正确）。洗膜、显影、定影 洗膜：将二抗弃掉，加入TBST进行洗膜，洗涤三次，每次5min。

二抗可以回收利用，但最好不要太多次，否则信号就没了，而且二抗也很便宜的，完全没有必要回收。一抗二抗是指非抗体性抗原和能和抗体结合，即抗体的抗体。全称第一抗体、第二抗体。可以与特定蛋白质或感兴趣的生物分子结合的抗体称为一抗。

回收的一抗怎么保存

回收的一抗这么保存：存储温度：一般来说，一抗应该在-20°C或更低的温度下保存。这可以防止抗体的降解和失活。分装和冻干：如果你有足够的量，可以将一抗分装成小份，每份适合单次使用，然后进行冻干保存。这样可以避免多次冻融对一抗质量的影响。

回收的一抗的保存时间和温度，不同的抗体具有不同的稳定性和保存要求，回收的一抗保存在4°二个月左右。一抗回收液使用方法如下：将膜充分浸泡于适当体积的WesternBlot一抗二抗洗脱液中，室温摇床洗脱10-20分钟，时间长短请参考后面的说明进行优化，部分抗体的洗脱可能需较长时间，更有60分钟之久。

western一抗室温下孵育，能回收。据相关资料显示，一次Western结束后，可以回收稀释的一抗4摄氏度保存，用于下次Western实验。一抗孵育完成后洗膜是为了洗掉未和膜结合的抗体，而不是磷酸盐。

抗体保存与重复使用 WB一抗可回收（4℃短期或-20℃长期保存，加防腐剂），但重复次数不宜过多。IHC一抗通常一次性使用，避免组织成分污染。特殊抗体处理 磷酸化抗体：稀释液需含BSA，禁用脱脂奶粉。荧光标记二抗：稀释液避光保存，避免淬灭。避免交叉污染 不同抗体需独立分装稀释，避免反复冻融降低效价。

试剂准备 5×SDS-PAGE电泳缓冲液：将Tris 11g、甘氨酸94g、SDS 5g溶解于蒸馏水中，并定容至1L。溶解后室温保存，使用时稀释为1×的工作液。转膜缓冲液：将Tris 03g、甘氨酸142g溶解于蒸馏水中，加入甲醇200ml，再定容至1L。4℃保存，使用前预冷。

一抗回收液多少度保存

℃。回收的一抗的保存时间和温度，不同的抗体具有不同的稳定性和保存要求，回收的一抗保存在4°二个月左右。一抗回收液使用方法如下：将膜充分浸泡于适当体积的WesternBlot一抗二抗洗脱液中，室温摇床洗脱10-20分钟，时间长短请参考后面的说明进行优化，部分抗体的洗脱可能需较长时间，更有60分钟之久。取出膜，用TBST漂洗两次，每次10分钟。

回收的一抗这么保存：存储温度：一般来说，一抗应该在-20°C或更低的温度下保存。这可以防止抗体的降解和失活。分装和冻干：如果你有足够的量，可以将一抗分装成小份，每份适合单次使用，然后进行冻干保存。这样可以避免多次冻融对一抗质量的影响。

western一抗室温下孵育，能回收。据相关资料显示，一次Western结束后，可以回收稀释的一抗4摄氏度保存，用于下次Western实验。一抗孵育完成后洗膜是为了洗掉未和膜结合的抗体，而不是磷酸盐。

WB一抗可回收（4℃短期或-20℃长期保存，加防腐剂），但重复次数不宜过多。IHC一抗通常一次性使用，避免组织成分污染。特殊抗体处理 磷酸化抗体：稀释液需含BSA，禁用脱脂奶粉。荧光标记二抗：稀释液避光保存，避免淬灭。避免交叉污染 不同抗体需独立分装稀释，避免反复冻融降低效价。

关于一抗回收利用，以及一抗回收液多少度保存的相关信息分享结束，感谢你的耐心阅读，希望对你有所帮助。